REGULATION DE LA FUSION MYOGENIQUE ET DE LA COSTAMEROGENESE PAR LA FOCAL ADHESION KINASE - Archive ouverte HAL Accéder directement au contenu
Thèse Année : 2006

REGULATION DE LA FUSION MYOGENIQUE ET DE LA COSTAMEROGENESE PAR LA FOCAL ADHESION KINASE

Regulation of myoblast fusion and costamerogenesis by focal adhesion kinase (FAK)

(1)
1

Résumé

Skeletal myogenesis is characterized by the fusion of mononucleated myoblasts into multinucleated myotubes whose maturation give rise to contractile myofibers. Integrin signaling regulates many aspects of myogenesis but the downstream pathways remain unclear. This project has focused on investigating the role of FAK, a major integrin effector, during early and late stages of differentiation of primary mouse myoblasts. Inhibition of FAK by adenoviral expression of a dominant negative inhibitor, FAT, or by antisense oligonucleotides has revealed that FAK is required for myoblast fusion. Real-time RT-PCR analysis suggested that FAK may regulate the expression of the 1D integrin subunit, a muscle specific isoform, to control muscle cell fusion. Microarrays were used to analyze gene expression patterns of fusion-defective myoblasts (i.e. expressing FAT) in order to broadly screen for genes involved in fusion. Among genes that have been shown to be involved in myoblast fusion but were dysregulated when FAK was inhibited were dysferlin, caveolin-3, M-cadherin and Id2. Novel FAK-dependent, fusion-related genes were also revealed. Finally, we studied myotube maturation and analyzed the role of FAK in costamere assembly using confocal microscopy and 3D reconstruction. These studies demonstrated successive stages of costamerogenesis (precostamere, nascent costamere, and mature costamere) and that FAK activity may be required for costamere formation by regulating myofibrilllogenesis. Together, these studies reveal an essential role of FAK in myoblast fusion and costamerogenesis and expand our understanding of the downstream signaling pathways by which integrins may regulate different phases of myogenesis
Le développement du muscle squelettique est caractérisé par la fusion de myoblastes mononuclées formant ainsi des myotubes multinuclées dont la maturation aboutit aux fibres musculaires contractiles. Le rôle des intégrines au cours de la myogénèse a été très étudié mais les voies de signalisation qu’elles régulent au cours de ce processus restent mal connues. Notre objectif fut d’étudier le rôle de FAK, un effecteur important des intégrines, pendant la différenciation précoce et tardive de myoblastes primaires de souris. L’inhibition de FAK par son dominant-négatif FAT ou par siRNA a montré que FAK est nécessaire à la fusion myogénique. L’analyse par RT-PCR en temps réel suggère que FAK régule l’expression de l’intégrine 1D, une isoforme spécifique du muscle, dans le contrôle de la fusion. Nous avons étudié par microarrays le profil d’expression de myoblastes présentant un défaut de fusion (i.e. qui expriment FAT). Cette analyse a permis de révéler des gènes dérégulés et potentiellement impliqués dans la fusion, dont la dysferline, la cavéoline-3, la M-cadhérine et Id2 qui sont déjà connus pour leur implication dans la fusion. Enfin, nous avons étudié la maturation des myotubes par microscopie confocale et reconstruction en 3 dimensions, et caractérisé ainsi différentes étapes (nommées « précostamère », « costamère naissant », et « costamère mature ») lors de la formation des costamères. Il semble que FAK soit essentiel à la costamérogénèse via une régulation de la myofibrillogénèse. En conclusion, nos données révèlent un rôle essentiel de FAK dans les processus de fusion myogénique et de costamérogénèse. Ces résultats contribuent à une meilleure compréhension des voies de signalisation impliquant les intégrines dans la régulation des différentes phases de la myogénèse
Fichier non déposé

Dates et versions

tel-03951648 , version 1 (23-01-2023)

Identifiants

  • HAL Id : tel-03951648 , version 1

Citer

Navaline Quach. REGULATION DE LA FUSION MYOGENIQUE ET DE LA COSTAMEROGENESE PAR LA FOCAL ADHESION KINASE. Life Sciences [q-bio]. Université Paris V Descartes, 2006. English. ⟨NNT : ⟩. ⟨tel-03951648⟩
0 Consultations
0 Téléchargements

Partager

Gmail Facebook Twitter LinkedIn More